斯泰克學堂 第23期:PVP 在組織培養中的應用
更新時間:2022-01
植物中外植體褐化是組織培養中常見的現象,是制約組織培養成功的因素。多酚氧化酶( PPO) 是末端氧化酶,在正常情況下植物體酚類物質與醌類分布在細胞內不同區域,酚類物質分布在液泡內,PPO 分布在質體和細胞質中與膜結合呈潛伏狀態,當外植體被切割后膜結構遭到破壞,PPO與酚類物質接觸,外植體傷口處在氨酸酶的作用下,與繁殖材料的蛋白質聚合,經非酶促反應聚合形成褐色物質,造成其他酶系統的失活而致代謝混亂,影響植物生長,并對植物產生毒害作用。為了控制外植體褐化,人們常在培養基中添加抗褐化劑達到預防褐化目的。
聚乙烯吡咯烷酮(PVP)是酚類物質吸附劑,它通過絡合作用吸附酚類物質阻止醌類物質形成,達到抗褐化之目的。實驗指出可以用低溫預處理外植體,在誘導培養基中添加褐變抑制劑PVP能更有效的抑制外植體褐變。這是因為低溫預處理外植體降低了氧化酶活性,從而抑制酚類物質氧化合成,而誘導培養基中添加抗氧化劑PVP能更有效抑制酚類物質氧化,從而降低醌類物質對外植體的毒害。適當的暗培養也可促進試管苗的生長和酶物質的增加添加PVP能夠有效吸附酚類化合物,降低醌的合成,從而減小褐化危害。并且PVP的添加有利于增殖芽苗的抽高生長,在0~8 g·L-1的濃度范圍內,各胚系隨PVP濃度的增加苗高生長增大。